平时实验没有做成功|我成功了做实验
工频耐压试验装置的电源接线：平时实验没有做成功，不一定是设计方案有问题，而往往是由于作上面的不认真，或是一些小小的细节没有注意到。以下是集各路朋友的一些经验，与大家分享（注意：实验需要靠自己摸索，下面的经验如果对你有启发的，切记先小试验证）：
院士用自己做高电压实险 高电压实验实验人员必须几人以上
院士用自己做高电压实险 高电压实验实验人员必须几人以上
1. 提取质粒的时候，一步的酒精挥发很关键，基本上是其后续的酶切反应的决定性因素。所以这一步尽量挥发长一点时间，是空调吹热风，或是37度温箱放长一点的时间，我试过室温过夜，酶切很好。
2. 有关缓冲液和培养基配置
1）将缓冲液配方中的成分分别以10－100倍配成母液储存，需要的时候只需将相应的母液混合，补加水稀释即可
2）配培养基时通常会忘记各成分的量，如配LB时的三个成分不记得到底哪个是5g，哪个要10个，因此可以在常用的试剂瓶的标签上注明所需的量，如配LB时，在NaCl瓶外注明10g/L,yeast 5 g/L, tryton 10 g/L等，很方便，不需要每次配之前临时翻书。
3. 有关PCR主反应液配置:
在做克隆鉴定的时候经常需要在酶切鉴定前进行PCR鉴定，每次配置PCR反应液很繁琐，可以将其配置类似kit的形式，按你需要的反应体系列表，然后放大100倍配置100×主反应液（100次反应），其中含buffer，Mg2＋，dNTPs，但不含引物和Taq酶，然后可以10×分装或一管储存在－20度，在需要的时候拿出融开，然后按所需的PCR反应个数吸取相应的倍数，再补加相应反应倍数的Taq和引物，混匀后分装，这样做的好处如下：
1）可极大的节省宝贵的时间，可早点收工，看球
2）避免每次反按照蒂德曼教给的方法，维勒经过刻苦钻研，终于在1823年，从动物尿和人尿中分离出了尿素。接着，他又在格美林的指导下，对尿素的化学成分做了全面分析。格美林的分析方法非常先进，维勒运用这种方法，地测定了尿素中氮、氢、氧和碳的成分，得到了一批数据，并由此查明了尿素的一些重要性质以及它在动物体内的生理作用。他的工作做得非常好，正是由于这项研究，维勒年仅23岁就获得了海德堡大学的医学博士学位。应加样不均的可能
3）大大减少PCR阳性的产生
4. 有关酶切反应液的配置:
在做酶切时，也可以像PCR一样配置主反应液，每次反应前先列好反应的体系，算好需要的反应数，然后按所需反应的体系按所需反应数放大，加入buffer、酶、水；质粒栏空缺，然后混合后按除质粒DNA的体积分装，然后再在每管中加入相应体积的质粒DNA酶切，这样做的好处如下，特别是当同时有10几个阳性克隆需要鉴定时尤为明显：
1）各反应成分均一
3）节省时间
5. 做大肠表达时确定蛋白是否表达一般要煮样做诱前诱后检测,但很多时候煮出来的很黏影响跑胶效果.我发现如果先用8MUrea重悬细菌再煮效果会有极大改善.
注:不能用Gu-HCl代替
6. 超滤最合适用于蛋白的浓缩，更换缓冲液和除盐，对于按照分子量进行初分离的效果不是很好，理论和现实是有很大别的^_^
7. 我们有时要沉淀东西时，由于沉淀量很少，离心完之后不知道到底有没沉淀下来东西，所以离心时建议按特定的方向放置离心管（比如EP管盖放同一方向），这样你就可以在离心之前确定沉淀的大致部位。另外看沉淀时可以对光看，这样就是颗粒状的细小沉淀也能看见的。
8. 大家都知道PMSF有剧毒，以前都是知道浓度和要配的体积的基础上,算出要称多少毫克的PMSF,其实也可以先称PMSF,称多少算多少,再调整的体积，到达你所要的浓度。这样就避免了你长时间和它接触。（就是说让你改变溶剂体积，配合质量，使最终浓度不变）
9. 在用酶标板加样的时候，蛋白样品常常会产生很多气泡，如果做荧光实验，由于灵敏度非常高，一点点微小的气泡都会影响很大，常常又不可能加消泡剂，我就用卫生纸，撕下来
11. 磁珠回收时，不要贪多，收集上层即可，太过影响DNA的纯度和质量，对链接、转化有影响。
12. 各种buffer都要完全融化后才能用，而且不管什么品，如果只剩下一点底子了，放弃，因为可能会影响你的实验。
13. 动手前，一定要思路清晰，尽量把要做的事情列出来。
14. 做前一定要在笔记上写上1、2、3.....，在按照笔记一步一步做，否则容易出错。（管家哥想说这点师弟师妹应该做的很好的吧，哈哈）
15. 要加的酶阿，dNTP，水啊之类的能分装的话分装好一点，万一污染的话就全完了。（管家哥提醒这点非常重要）
16. 制备好了一批感受态，马上转化一种已知质粒，与此同时，取一点感受态接种到含抗性的固/液体培养基培养来做对照。这样第二天即可以知道这批感受态是否还有外源质粒，又可以知道这批感受态转化效率的高低。如果合格，那以后就可以放心使用！
17. 做克隆挑斑时，我们可以在将沾有菌体的牙签丢到试管前，在一块相应抗性的平板上点一下，标注清楚，培养时间稍长一点，待长成较大菌落后收取。以后需要哪一个菌,就在平板上挑取。这样既方便快捷，又可以保证菌的一致。
19. 抽提质粒时，用沉淀的时间可以由实验作者来决定，如果时间充裕可以30min，否则8-10min也可以。至于温度，个人觉得-20度好于常温。如果加入可醋酸钠，会较容易形成盐类杂质，所以时间短一些更好！
20. 不知道大家都是怎么做酶切的，我的体会是，酶切质粒时，两个酶分别单酶切比直接双酶切效果要好很多（管家哥提醒这个要视不同体系而定）。我有一次双酶切两次都没连出来，后来分步单酶切，连接效率几乎。
或者个切完后用抽提，把蛋白提出
或者中间回收，这个就要考虑回收效率和损失的问题了，但是这样除蛋白最
21. 任何试剂反复冻融对其效率都有很大地影响。所以买来的试剂次使用时要注意按每次实验用量分装保存。提取的模板或纯化的样品也分装保存，以备不测。
在大家的留言中，涉及最多的就是关于蛋白电泳方面（爱之深责之切啊），管家哥单独列出来：
1. 跑page胶的时候，小电压跑会避免高电压产生的热量尔导致的胶层变形。低电压泳道会比大电压泳道跑的直一些，且分离效果更高，有利于分子量相不大的蛋白分离。
2. 做WESTERNBLOT 的时候，大家往往会摸索一抗、二抗的浓度，封闭时间，曝光时间等等，而每次变换其中的一个条件就需要从新跑胶、转膜，甚至重新提蛋白，这样会浪费大量
的时间。其实完全没有必要这样。一次转膜后，将PVDF膜晾干，裁减成小块，保存起来，用的时候取出一块，没有任何影响。这对于摸索条件的战友来说，节约了大量的时间。
3. 可将SDS－PAGE的积层胶，分离胶预先配好大体积如100ml储存在4度冰箱（注：10％AP，TEMED不加，切记！！！），每次配置时只需吸取相应体积的预制胶加入AP，TEMED即可，没必要每次制胶时候翻分子克隆，特别方便，而且，这样的预制胶可储存半年以上，不失为偷懒的绝佳方法；更关键的是可大大减少与丙稀酰胺的接触，因此大大减少中毒的机会。
4. 电泳时虽然小电泳分离效果要好一些，但2小时以上的等待的时间实在是痛苦，因此可以提高电泳至150V，但需要将整个电泳槽放在放满冰水的脸盆里散热，这样跑出来的胶分离效果丝毫不比低电压来的，关键是时间大大节省，不需1h即可看结果了。
5. 做SDS-PAGE的时候，除了蛋白量上样一致，体积也一致，这样跑出来的胶各个泳道之间的band能做到一样宽，方便后面的比较，特别是WB。做法就是拿1X的上样缓冲补全要加的样做到体积一致，否则跑出来会有的宽有的窄，特别是上样体积相较大的。
6. 在把蛋白胶做成干胶时，很多时候会因为有气泡使胶裂掉，我的经验是在做胶时加上层膜前在胶上多加些水就不容易进气泡了，还有就是高温烘胶（管家哥提醒慎用），我喜欢放到60度烘箱里烘，这样水分蒸发速度快，即使有一些小的气泡也不会有影响，呵呵，这是经验之谈，我从来都没失手过，大家可以试试。
7. 做SDS-PAGE跑胶通常都是现配现用,但配胶要>1h,所以如果想第二天睡个懒觉而又不耽误跑胶可以于前一天晚上做好浓缩胶和分离胶,待凝聚后不要拔下梳子,把含胶玻璃板从制胶槽取下,用保鲜膜包上,注意玻璃板上下两边缘会有气体,所以需要加一点电泳缓冲液以避免胶内水分蒸发.然后放4度过夜.第二天直接拔下梳子行后续.国外好多公司出售脚既是如此,可以保存上星期。
8. 配置分离胶或者非变性胶时因胶凝时收缩可导致加样孔变浅.可以将加剩的胶放入4度以降低凝聚速度,而将凝胶放入37度促聚,并随时用4度加剩的胶补充下降的胶面。
9. 做westernblotting 转膜时，胶放在转膜缓冲液中一段时间，待胶在含有甲醇的缓冲夜中缩小的不多后装好转膜装置，我的经验是把膜印在胶上直接在膜上画出预染maker条带，方便的很。因为很多时候跑电泳时胶上的预染maker很清楚，等转膜后就不是分辨的很清楚了。不过要注意画好预染maker后就不要使胶和膜发生对位移动了，以防maker失去参照价值。
10. 器具的清洁非常重要，开始做前，为了安全，尤其是装胶的厚薄玻璃板，可以先用中性洗涤剂和自来水反复冲洗，确保无洗涤残液后用蒸馏水冲洗2－3遍，然后用去离子水冲洗一遍。用95％酒精再擦一遍后晾干备用。
11. 配胶现用现配，先配下层胶（分离胶），后配上层胶（浓缩胶或积层胶），而且在临灌胶前加APS并迅速混匀，即用移液枪抽吸与注入1－2次即可。（管家哥提醒，有条件现配现用，如果是配好板子的，也尽快在2天内使用，同时保鲜膜注意密封好。）
12. 跑蛋白page的时候，一开始用加样针，太麻烦，发现用20ul枪+普通小白枪头点样，非常省事。另外，点样时有可能看不清孔在哪，看远离你的那面胶，孔有反光的。点样也点你对面的那块胶，省的总低头，干咱这行的容易得颈椎呀，爱惜自己。
13. 垂直电泳时，可在电泳糟中放入青霉素小瓶等，可自然使液面提高而不影响电泳，又很节约电泳缓冲液。（管家哥没试过，慎用）
14. 配胶时不要反复用枪混，稍微摇混就可以了，用枪混多次会导致胶凝不好影响电泳图的分辨率。
15. AP分装成500微升一管保存放-20度，避免AP用太久失效。
17. 电泳完撬胶时根本不需要用撬胶板，在一平皿里装好水，把有胶一面的放在水中晃动几
次胶很容易就脱落下来，一点没有问题，方便的很。
18. 点样时样品别忘了离心这步，因为上样含有固体沉淀会影响电泳图分辨效果。
今天就先到这里！如果你想了解更多实验方面的信息，欢迎私信楼主。最近正在整理细胞生物学实验集锦，敬请期待。
新电缆线路或架空电缆混合线路电压冲击实验怎么做
进行校相，一是防止在线路进行并列时发生相间短路，
电力电缆的交接试验内容有：测量绝缘电阻；直流耐压试验及泄漏电流测量；交流耐压试验；测量金属屏蔽层电阻和导电体电阻比；检查电缆线路两端的相位；充油电缆的绝缘油试验；交叉互联系统试（7）做直流耐压时，试验电压按每级0.5倍额定电压分阶段升高，每阶段停留1min，并记录泄漏电流。验。
交接试验注意事项：
（1）在高压试验设备和高电压引线周围，均应装设遮拦并悬挂贝采里乌斯的反对是有原因的。当时，有机化学还处于概念不清的阶段，很多人认为有机物就是专指动植物组织。18世纪末生物学界广泛流行的活力论，对有机物的研究也带来了某种神秘色彩。贝采里乌斯深受这种观点影响，他还对之做了系统表述。他认为，化学物质分为两类，一类是无机物，与生命无关；另一类是有机物，它来源于有生命的组织，含有生命力。无机化学的定律并不全都适合于有机物。贝采里乌斯相信在制成有机物时需要“生命力”，而“生命力”在实验室里是不可能找到的，因此化学家不可能在没有生命组织的帮助下，从无机物合成有机物。这就是说，在有机化学和无机化学之间横亘着一条鸿沟，它们是不可逾越的。警示牌。
（2）进行高电压试验时，作人员与高电压回路间应具有足够的安全距离。
（4）凡吸收比小于1.2的电动机，都应先干燥后再进行交流耐压试验。
（5）断路器的交流耐压试验应在分、合闸状态下分别进行。
（6）除制造厂装配的成套设备外，进行绝缘试验时，宜将连接在一起的各种设备分离开来单独进行。
工频高电压实验为什么相邻两次球隙击穿要间隔
工频耐压试验就是用超过被试品额定电压一定倍数的工频高压，来代替设备实际运行过程中所能承受的内部过电压，按规定对被试品绝缘作一定时间（通常为1分钟）的试验。他能有效跌发现绝缘中的集中性缺陷，考核鉴定设备的绝缘水平。网上有成套的耐压试验装置，接线很简单的，具体接线看说明书。试验中要注意未试验侧必须短路接地。热击穿电压作用时间长。工频高电压实二是在线路自动装置动作时，因动作时间短或线路较长呈容性，发生由于不同相，而造成对下级三相用电设备的冲击。验中在球隙放电的初始阶段，由于电场强度超过气体的电离电位，使得气体分子开始电离，产生自由电子和正离子，相邻两次球隙击穿要间隔是因为热击穿电压作用时间长。
输配电装备及系统安全与新技术重点实验室（重庆大学）的学术组织
绝缘试验（绝缘电阻、吸收比、极化指数、介质损耗及电容量、绕组直流泄露电流）、变比及接线组别测量、绕组直流电阻测量、绝18. 抽提质粒时，加入SloutionII和III后要求轻柔混匀。我个人觉得不用这样，只要不是非常剧烈，可以快速混匀。尤其可以运用在一次抽提多管质粒的时候，这样可以快速，而且效果一点也不。缘油耐压试验实验室学术委员会由15位专家组成，孙才新院士为主任，50岁以下中青年学术委员占了40%，依托单位学术委员人数为5人。学术委员会负责把握实验室的总体研究方向，制订开放研究课题指南，规划、实验室的学术发展；组织对外学术交流与联合科技攻关，联系、拟引进的高水平人才；培养创新研究团队或群体。
高电压实验时接地杆使用的接地线应使用什么
那么工频耐压试验装置接线图原理是什么呢？金属的。
铜或铝有较好的导电性能。接地线应是足够粗厚的，以承受实验中会出现的高电流。在高电压实验中，自动捕捉峰值电压、电流，便于做击穿试验；接地杆用于将电荷释放到地面，以确保实验环境的安全。为了连接接地杆和地面，应使用具有良好导电性能的接地线。
1887年德国物理学家赫兹用什么实验证实了电磁波的存在
负载试验：模试验电压值按DL/T593－1996规定执行。试验时，试验电压的施加方式：合闸时各相对地及相间；分闸时各相断口间、相间、相对地及断口的试验电压值相同。比方说高压开关做耐压有三项：1，三相对地：开关闭合，高压接开关，外壳接地。2，相间：开关闭合，A相和C相接地，B相接高压。3，断口：开关断开，高压接动触头，静触头接地。拟变压器在负载条件下的运行情况，评估其负载能力和稳定性。设备：负载箱。赫兹实验赫兹实验 赫兹在柏林大学随赫尔姆霍兹学物理时，受赫尔姆霍兹之鼓励研究麦克斯韦电磁理论，当时德国物理界深信韦伯的电力与磁力可瞬时传送的理论。因此赫兹就决定以实验来证实韦伯与麦克斯韦理论谁的正确。依照麦克斯韦理论，电扰动能辐射电磁波。赫兹根据电容器经由电火花隙会产生振荡原理，设计了一套电磁波发生器，赫兹将一感应线圈的两端接于产生器二铜棒上。当感应线圈的电流突然中断时，其感应高电压使电火花隙之间产生火花。瞬间后，电荷便经由电火花隙在锌板间振荡，频率高达数百万周。由麦克斯韦理论，此火花应产生电磁波，于是赫兹设计了一简单的检波器来探测此电磁波。他将一小段导线弯成圆形，线的两端点间留有小电火花隙。因电磁波应在此小线圈上产生感应电压，而使电火花隙产生火花。所以他坐在一暗室内，检波器距振荡器10米远，结果他发现检波器的电火花隙间确有小火花产生。赫兹在暗室远端的墙壁上覆有可反射电波的锌板，入射波与反射波重叠应产生驻波，他也以检波器在距振荡器不同距离处侦测加以证实。赫兹先求出振荡器的频率，又以检波器量得驻波的波长，二者乘积即电磁波的传播速度。正如麦克斯韦预测的一样。电磁波传播的速度等于光速。1888年，赫兹的实验成功了，而麦克斯韦理论也因此获得了无上的光彩。赫兹在实验时曾指出，电磁波可以被反射、折射和如同可见光、热波一样的被偏振。由他的振荡器所发出的电磁波是平面偏振波，其电场平行于振荡器的导线，而磁场垂直于电场，且两者均垂直传播方向。18在一次的演说中，赫兹明确的指出，光是一种电磁现象。次以电磁波传递讯息是1896年意大利的马可尼开始的。1901年，马可尼又成功的将讯号送到大西洋彼岸的美国。20世纪电通讯更有了异常惊人的发展。赫兹实验不仅证实麦克斯韦的电磁理论，更为电、电视和雷达的发展找到了途径。
请问，我用个S8550来做实验，E脚接24V(+) , C脚接断电器负，还没接B脚那断电器就功能了
工频耐压试验具体实验方法如下：对220kv及以下电气设备也用它来检验绝缘耐受作过电压，暂时过电压的能力。试验时，按规定将被试品接入试验回路，逐步升高电压至标准规定的额定工频耐受电压值，保持1min，然后迅速、均匀地降压到零，在规定的时间内，被试品绝缘未发生击穿穿或表面闪络，则认为通过了该项试验。很可能管脚弄错了，另外，即使管脚没弄错，发射极B必须径很大的限流电阻接地，否则发射结立即损坏，一个PN结相当于一个二极管，正常工作电压只有0·7V，你敢把24V直接加上去，损坏是必然的
可以个酶切完后直接把体系热失活，（根据酶说明书上一般是65度20min）然后直接向里面补第二个酶另外，初次实验，在没有把握的情况下，不要用这么高电压，24V对于8550这样的三极管已经很高了
高压高电压实验时实验人员必须几人以上
2）可大大减少限制型内切酶的使用两人以上。根据查询《电工安全工作规范》信息显示，进行高电压实验时，必须两个人以上李比希则对维勒的工作评价很高。他与维勒之间关于的那段公案已经了结。贝采里乌斯与法国化学家盖-吕萨克都已证明，李比希和维勒得到的物质分子式是相同的，但其性质确实不同。贝采里乌斯把这种具有相同分子式的不同化合物称为同分异构体。这一概念表明，相同原子的不同排列会导致不同的化学性质。结构化学就是在这一概念下发展出来的。由此可见，他与维勒的这场科学竞赛，导致了结构化学的诞生。因此，这场比赛，两人都是赢家。但李比希没有想到的是，在这场竞赛中，维勒竟然意外地人工合成了尿素，摘了一个大苹果。才能开展工作，并且必须有经验丰富的监护人员带队，实验人员必须做好绝缘防护，同时监护人员必须做好绝缘防护措施，确保实验人员安全。
高电压实验时接地杆使用的接地线应使用什么
获得博士学位以后，维勒来到瑞典的斯德哥尔摩大学贝采利乌斯实验室，为他仰慕已久的贝采利乌斯做助手，跟随这位“化学巨人”一道从事研究工作。在那里，他进一步充实了自己，学到了更为先进的实验和分析方法。而且，他还与贝采利乌斯成了莫逆之交。在日后的岁月里，两人的学术观点时有不同，但他们的友谊却一直保持了下来。普通带绝缘层的多股铝线。普通带绝缘层的多股铝线由多股铝线组成，外层包裹绝缘层，具有较高的电气性能和耐久性，能够有效地保护设备和人身安全，所以在高电压实验时接地杆使用的接地线应使用普通带绝缘层的多股铝线。
16. 倒胶时把玻璃板中的水用滤纸尽量吸干，因为微量的水存在会影响配的胶浓度。